大分子相互作用测试
HRBio公司拥有的BIAcore 3000生物传感器具有需要样品量少和自动化程度高等优点,在定量的结合反应研究中几乎没有误差。
BIA技术应用的领域主要有四个方面:
1、动力学常数的测定
2、浓度的测量
3、分子相互作用模式的研究
4、蛋白质功能分析
提供的服务包括:
1、相互作用分析: 蛋白-蛋白,蛋白-小肽,蛋白-DNA,蛋白和药物分子,以及其它分子间相互作用分析。 摸索结合条件,测定结合动力学数据(ka,kd,KA, KD);
2、抗体筛选;依据动力学数据进行筛选,比单纯根据亲和力判断更为可靠,因为亲和力相同的抗体,动力学常数可能相去甚远;
3、复合物中目标分子的浓度测定: 大分子、 小分子, 药物等浓度的测定;
4、结合质谱技术寻找未知的蛋白。
HRBio公司拥有独立操作BIAcore 仪器的科学研究者,我们会对您的项目方案进行优化,提供指导服务,并为您提供价廉质优的SPR芯片供合作使用。

实验举例:

 

 

 

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【实验结果】

1、 HRBio芯片的非特异性吸附低于仪器检测极限

低于仪器检测极限的非特异性吸附

Protein

Concentration
( μg mL-1)

△RU

样本A

50

-1.1

样本B

10

9.7


2、样本A的固定



3、 Ags与Abs的相互作用
【动力学分析】采用公式(1)对SPR曲线进行拟合[1-3]
(1)





                       (2)



                       (3)

Protein

样本

ka
(μg-1 mL s-1)

9.0×10-4

kd (s-1)

0.0032

KA(μg-1 mL)

0.28

R2

0.979

4、样本A/样本B


Concentration
(μg mL-1)

A

B

6.25

318

0.008761

3.12

256

0.006539

1.56

148

0.004655

0.78

66

0.003338

拟合结果
ka = 0.0009 μg-1 mL s-1?
kd = 0.0032 s-1
KA=ka/kd
=0.28 μg-1 mL
R2 = 0.979


 

 

 

 

 

 

 

 

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